液基薄层细胞学与高危人乳头瘤病毒联合检测在宫颈癌前病变筛查中的应用

摘要：目的 探讨薄层液基细胞学检查（TCT）联合高危人乳头瘤病毒（HR-HPV）检测在宫颈癌前病变筛查中的临床价值。方法 将2010年1月~2013年6月在我院接受宫颈癌筛查的妇女2993例，同时行TCT与HPV-DNA检测，任何一项或两项同时阳性病例行阴道镜下多点活检病理学检查，以宫颈活检的组织病理学结果为确诊标准。比较三种方法阳性病例与病理检查结果符合率。结果 TCT检出阳性221例，占7.38%，病理检查阳性163例，阳性符合率73.36%；HR-HPV检出阳性736例，占24.59%，病理学检查阳性157例，阳性符合率为21.33%; HR-HPV、TCT检出均阳性153例，占5.11%，病理检查阳性145例，阳性符合率为94.77%，各组之间阳性符合率比较，差异有显著性(P<0.05)；HR-HPV在不同宫颈病变中的阳性率分别是CINⅠ69.76%(173/248)、CINⅡ85.24%(104/122)、CINⅢ 96.62%(86/89)、SCC 100%(6/6)。结论 检查TCT是宫颈癌筛查中的最有效的方式，若联合高危型HPV-DNA检测用于宫颈癌筛查更能提高宫颈癌前病变的检出率。

关键词：薄层液基细胞学（TCT）；高危型人乳头瘤病毒（HPV）；宫颈癌前病变宫颈癌是导致妇科恶性肿瘤患者死亡的主要原因之一，近年来，我国宫颈癌发病率和死亡率逐年上升，并趋于年轻化。目前已证明HPV感染是宫颈癌发生的必要条件和主要原因，宫颈癌也是人类所有癌症中惟一病因明确的癌症[1]。从HPV感染到宫颈癌的发生需要多年甚至数10年的时间，许多专家认为，宫颈癌是可以早期发现、早期治疗的疾病[2]。因此早期筛查、早期诊断、早期治疗，在宫颈癌的防治工作中占有非常重要的地位。本文通过比较两种方法联合使用和单独使用对宫颈上皮病变的筛查效果，评价高危型人乳头瘤病毒检测联合细胞学检查在宫颈癌筛查中的应用价值。

1资料与方法

1.1一般资料2010年1月~2013年6月在我院体检中心及门诊接受宫颈癌筛查的妇女2993例，年龄22～65岁，平均33.6岁。受检者符合以下情况：无子宫切除史或宫颈手术史，无细胞学检查或宫颈上皮内瘤变史，无盆腔放射史，有性生活史2年以上并目前无妊娠。

1.2方法

1.2.1 TCT检查采集标本应用专用采样器，先用棉签拭净宫颈黏液及血液，用采样器在宫颈管内转动3～5圈，然后取出采样器迅速放入固定液内摇动数次，将瓶身填写患者信息送检。诊断标准采用Bethesda系统(TBS)分级系统，即：正常范围(WNI)、意义不明的不典型鳞状上皮(ASCUS)及腺上皮(AGCUS)，鳞状上皮内病变(SIL)和鳞状细胞癌(SCC)。SIL包括低度鳞状上皮内病变(LSIL)及高度鳞状上皮内病变(LSIL)。阳性诊断为意义不明的不典型鳞状上皮及腺上皮(ASCUS及AGCUS)以上病变。

1.2.2 HPV分型检测采用深圳亚能生物技术有限公司生产的人乳头瘤病毒分型基因芯片检测系统进行PCR扩增、杂交、洗膜及显色，通过基因芯片阅读仪上扫描，结果自动识别。可以同时检测18种高危亚型: 16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、83、MM4。

1.2.3宫颈组织病理学检查对HR-HPV阳性、TCT检查阳性者均在电子阴道镜指导下取活检行组织病理学检查。组织病理学诊断标准分为：①正常或炎症；②宫颈上皮内瘤变Ⅰ级(CINⅠ)；③宫颈上皮内瘤变Ⅱ级(CINⅡ)；④宫颈上皮内瘤变Ⅲ级(CINⅢ及原位癌)；⑤早期浸润癌和浸润癌。病理组织学诊断阳性为CINⅠ及以上病变。

1.3统计学方法应用SPSS17.0软件对数据分析统计，计数资料采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1 TCT检查阳性病例与病理检查阳性符合率高于HR-HPV检测阳性病例与病理检查阳性符合率；高危型HPV-DNA联合TCT检查与病理检查结果的阳性符合率明显高于单项HR-HPV和TCT检查的阳性符合率，各组差异有显著性(P<0.05)。见表1。

2.2随着宫颈病变级别的升高，HR-HPV的感染率显著上升(P<0.05)。见表2。

3讨论

宫颈癌是一种严重危害妇女健康的恶性肿瘤，近年来由于HPV的感染，其发病率有上升的趋势，而年轻妇女患宫颈癌的发生率有明显增加的趋势。我国存在发病率高、死亡率高、普查率低的现状。普查率低是宫颈癌高发的重要原因，CIN约10年发展为原位癌，原位癌发展为浸润癌约需3～10年，而CIN发展为浸润癌可能需10～15年，如果能在前驱病变阶段确诊，对早期宫颈癌病变的治疗效果远好于中、晚期宫颈癌的治疗效果。文献报道[3]，宫颈浸润癌患者的5年生存率为67%，早期宫颈癌患者为90%，而宫颈原位癌患者则几乎达到100%，因此早期筛查、早期诊断、早期治疗，将其阻断在癌前病变阶段，在宫颈癌的防治工作中占有非常重要的地位。液基细胞学检查患者无痛苦，无严重并发症，能明显提高宫颈异常细胞检出率，准确率高，为宫颈疾病的预防，早期诊断、早期治疗提供了可靠的依据。本研究中TCT检出阳性221例，占7.38%，病理检查阳性163例，阳性符合率73.36%，明显高于高危HPV阳性病例与病检阳性复合率，可见应用液基细胞学是进行宫颈癌筛查的有效方式，但仍有部分CIN会被遗漏。

大量流行病学及分子生物学已经证明，HPV感染是宫颈癌及宫颈上皮内瘤变（CIN）的主要病因，高危型HPV感染是宫颈癌及其癌前病变的必要条件。据报道[4]宫颈癌HPV检查率可达99.7%，HPV感染使宫颈癌的相对危险性增加250倍，HR-HPV感染持续存在最终致宫颈癌变，HPV感染就是可能患病的信号。因此，许多学者提出[5，6]，应将检测HPV作为筛查宫颈癌的手段，采用基因芯片法可同时检测18种高危型HPV，具有敏感度高且同时检测高通量HPV亚型的优点，可提高宫颈癌病变的阳性检出率。本研究中TCT、HR-HPV同时阳性病例与病理检查结果阳性符合率明显高于单纯TCT检查为，HR-HPV的阳性率随宫颈病变程度的增加而逐渐增高，因此，HPV 检测可以作为宫颈癌细胞学筛查的补充。将TCT与HPV两种检测方式联合应用于宫颈早期病变的筛查中，其敏感性显著提高，同时可降低HPV检测特异性低及造成假阳性妇女过度治疗的风险。

参考文献：

[1]范文生，李亚里，杨怡卓,等.基因芯片技术检测宫颈病变中HPV感染的临床研究[J].中华医院感染学杂志，2009，19（7）：745－747.

[2]黄谷孙，林奕华，叶珊.宫颈炎患者人乳头瘤病毒基因分型的研究[J].中华预防医学杂志，2008，9（3）：189－191.

[3]Spitzer M, Apgar BS, Brotzman GL. Management of histologie abnormalities of the cervix[J]. Am Fam Physician,2006,73(1):105112.

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[5]李亚里,杨怡卓.人乳头瘤病毒亚型检测在宫颈病变分流管理中的意义[J].中国实用妇科与产科杂志,2007,23(7):501-503.

[6]Screening and cloning of the down-regulation gene by recombinant interferon-B using suppression subtractive hybridization technique[J]. Zhonghua Shi He Lin Chuang Bing Du Xue Za Zhi,2006,20(3):273-275.编辑/哈涛