斑鸠菊的化学成分研究

摘要[目的]研究斑鸠菊的化学成分。[方法]利用硅胶层析、树脂层析、Sephadex LH-20凝胶层析和ODS反相层析等技术，对斑鸠菊乙醇提取物进行分离纯化，通过波谱数据进行化學成分鉴定。[结果]从斑鸠菊中共分离得到7个化合物，分别鉴定为山奈酚、木犀草素、芹菜素、槲皮素、2（S）-7，3′，5′ -三羟基二氢黄酮、谷甾醇、豆甾醇。[结论]7个化合物均为首次从该植物中分离得到。

关键词斑鸠菊属；斑鸠菊；化学成分；分离；纯化

中图分类号R284.1文献标识码A文章编号0517-6611（2018）05-0191-02

Abstract[Objective]The research aimed to study the chemical constituents of Vernonia esculenta.[Method]Silica gel chromatography， resin chromatography， Sephadex LH20 gel chromatography and ODS reverse phase chromatography were used to isolate and purify ethanol extract of Vernonia esculenta. The chemical constituents were identified by spectral data.[Result]Seven compounds were isolated from Vernonia esculenta， and they were identified as kaempferol， luteolin， apigenin， quercetin， 2（S）7，3′，5′trihydroxyflavanone，sitosterol，stigmasterol. [Conclusion]Seven compounds were isolated from Vernonia esculenta for the first time.

Key wordsVernonia；Vernonia esculenta；Chemical constituents；Separation；Purification

斑鸠菊（Vernonia esculenta）是菊科斑鸠菊属的植物，该属植物约1 000种，主产热带地区；我国有30余种，分布在西南至东南部和台湾[1]。我国民间作为草药入药，全草药用，清热解毒、生肌敛疮，主治阑尾炎、疮疖、烫火伤[2]。该属植物在美洲被用作驱虫、抗疟植物药，疗效显著。国内外学者曾对该属植物的化学成分有较多研究，发现主要成分为倍半萜类、三萜、黄酮、甾体、挥发油等，这些成分展现了多方面的药理活性，如抗肿瘤、抗真菌、抗疟等[3]。为了发现抗肿瘤活性物质，笔者对斑鸠菊乙醇提取物活性进行了评价，发现该植物全草乙醇提取物具有较强的抗肿瘤活性，因此对斑鸠菊乙醇提取物的化学成分进行了研究。

1材料与方法

1.1试验材料

斑鸠菊全草采集于我国贵州，由福建省亚热带植物研究所陈华良博士鉴定为Vernonia esculenta，药材标本保存于武汉轻工大学天然产物资源开发与利用研究室。

1.2试验仪器

Bruker AV 400型核磁共振波谱仪（瑞士布鲁克公司）；十万分之一分析天平（日本岛津公司，AUWl20D）；数显恒温水浴锅（常州丹瑞实验仪器设备有限公司，HH-D4）；柱层析硅胶（100～200目，青岛海洋化工厂）；MCI GEL CHP 20P（日本三菱化学公司）；D101大孔吸附树脂（天津兴南允能高分子技术有限公司）；ODS中压色谱柱填料（日本YMC公司）；Sephadex LH-20（Pharmacia 公司）；化学试剂均为分析纯（国药集团化学试剂有限公司）。

1.3试验方法

斑鸠菊全草5 kg，粉碎，以95%乙醇加热回流提取3次，将提取液合并浓缩至无醇味。浓缩液石油醚萃取后乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取液蒸干，得浸膏82 g。

将浸膏少量硅胶拌样，经硅胶层析柱层析，氯仿-甲醇梯度洗脱，通过TLC检测，并合并得到4个部分Fr I～IV。Fr I经硅胶层析，石油醚-丙酮梯度洗脱，得化合物6（14.2 mg）和化合物7（10.5 mg）。Fr II经过MCI树脂（甲醇-水梯度洗脱），硅胶柱层析（氯仿-甲醇洗脱）、反相柱层析（甲醇-水梯度洗脱）以及凝胶柱层析（甲醇洗脱）进行分离纯化，得化合物3（8.8 mg）、化合物5（12.8 mg）。Fr III经MCI树脂（甲醇-水梯度洗脱），硅胶柱层析（氯仿-甲醇梯度洗脱）、MPLC以及凝胶柱层析（甲醇洗脱）进行分离纯化，得化合物1（19.6 mg）和化合物2（20.4 mg）。第三部分Fr IV，经硅胶柱层析（氯仿-甲醇洗脱）、MPLC以及凝胶柱层析（甲醇洗脱）进行分离纯化，得化合物4（25.2 mg）。

2结果与分析

试验分离得到的7个化合物的结构见图1，化合物1～7经过核磁共振波谱技术测定，与参考文献进行对比，其中5个黄酮类化合物，2个甾体类化合物，7个化合物均为首次从斑鸠菊中分离得到。

2.1化合物1黄色粉末，紫外灯 254 nm下有暗红色荧光，茴香醛-浓硫酸显色呈黄色，AlCl3显色呈黄色荧光。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）δ：12.51（s，1H，OH-5），8.18（2H，d，J=8.5 Hz，H-2′，H-6′），7.04（2H，d，J=8.5 Hz，H-3′，H-5′），6.56（1H，d，J=2.0Hz，H-8），6.29（1H，d，J=2.0Hz，H-6）；13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δ：178.0（C-4），166.5（C-7），161.6（C-5），160.9（C-4′），159.8（C-2），159.1（C-9），137.5（C-3），132.0（C-2′），132.0（C-6′），124.8（C-1′），117.8（C-3′），117.8（C-5′），105.4（C-10），99.98（C-6），96.0（C-8）。以上数据与文献[4]报道的化合物山奈酚基本一致。

2.2化合物2

黄色粉末，紫外灯 254 nm下有暗红色荧光，茴香醛-浓硫酸显色呈黄色，AlCl3显色呈黄色荧光。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）δ：12.97（s，1H，OH-5），7.47（1H，d，J=8.5 Hz，H-6′），7.37（1H，s，H-2′），6.87（1H，dd，J=8.5 Hz，H-5′），6.66（1H，s，H-3），6.65（1H，s，H-8）；13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δ：183.5（C-4），165.4（C-2），164.9（C-7），162.9（C-9），158.0（C-5），151.3（C-4′），147.9（C-3′），123.1（C-1′），120.4（C-6′），117.6（C-5′），114.7（C-2′），104.5（C-3），104.2（C-10），98.4（C-6），95.7（C-8）。以上数据与文献[5]报道的化合物木犀草素基本一致。

2.3化合物3

黄色粉末，紫外灯 254 nm下有暗红色荧光，茴香醛-浓硫酸显色呈黄色，AlCl3显色呈黄色荧光。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）δ：12.98（s，1H，OH-5），7.89（2H，d，J=8.5 Hz，H-2′、H-6′），6.92（2H，d，J=8.5 Hz，H-3′、 H-5′），6.73（1H，d，J=2.0 Hz，H-8），6.43（1H，s，H-3），6.15（1H，d，J=2.0 Hz，H-6）；13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δ：182.3（C-4），165.4（C-2），164.1（C-7），1628（C-5），162.3（C-4′），158.1（C-9），128.5（C-2′），128.5（C-6′），121.9（C-1′），116.4（C-3′），116.4（C-5′），104.6（C-10），103.5（C-3），99.5（C-6），94.4（C-8）。以上数据与文献[6]报道的化合物芹菜素基本一致。

2.4化合物4

黄色粉末，紫外灯 254 nm下有暗红色荧光，茴香醛-浓硫酸显色呈黄色，AlCl3显色呈黄色荧光。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）δ：12.98（s，1H，OH-5），7.70（1H，d，J=2.5 Hz，H-2′），7.56（1H，dd，J=8.5，2.5 Hz，H-6′），6.91（1H，d，J=8.5 Hz，H-5′），6.43（1H，d，J=2.5 Hz，H-8），6.21（1H，d，J=2.5 Hz，H-6）；13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δ：176.9（C-4），165.0（C-7），161.8（C-9），157.2（C-5），148.7（C-4′），147.9（C-2），146.1（C-3′），136.8（C-3），123.0（C-1′），121.0（C-6′），116.7（C-5′），116.1（C-2′），104.0（C-10），99.2（C-8），94.4（C-6）。以上数据与文献[7]报道的化合物槲皮素基本一致。

2.5化合物5

黄色粉末，茴香醛-浓硫酸显色呈黄色，AlCl3显色呈黄色荧光。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）δ：763（1H，d，J=6.4 Hz，H-5），6.89（1H，s，H-4′），6.75（1H，s，H-6′），6.75（1H，s，H-2′），6.49（1H，dd，J=6.4，2.4 Hz，H-6），6.32（1H，d，J=2.4 Hz，H-8），5.37（1H，dd，J=12.6，3.0 Hz，H-2），3.03（1H，dd，J=16.8，12.6 Hz，H-3a），2.62（1H，dd，J=16.8，3.0 Hz，H-3b）；13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δ：190.8（C-4），169.2（C-9），164.1（C-7），146.5（C-3′），146.1（C-5′），130.9（C-1′），129.3（C-5），118.8（C-2′），116.3（C-6′），116.2（C-10），115.2（C-4′），103.5（C-8），111.5（C-6），79.9（C-2），44.2（C-3）。以上数据与文献[8]报道的化合物2（S）-7，3′，5′ -三羟基二氢黄酮基本一致。

2.6化合物6

白色粉末，茴香醛-浓硫酸显色呈红色。1H-NMR（CDCl3，400 MHz）δ：5.37（1H，brs，H-6），3.53（1H，m，H-3），1.00～0.60（6 × CH3）；13C-NMR（CDCl3，100 MHz）δ：141.7（C-5），122.7（C-6），72.8（C-3），57.8（C-14），57.0（C-17），51.1（C-9），46.9（C-24），43.3（C-13），43.2（C-4），40.8（C-12），38.2（C-1），37.5（C-10），37.1（C-20），34.9（C-22），32.9（C-7），32.8（C-8），32.6（C-2），30.1（C-25），29.2（C-16），27.0（C-23），253（C-15），24.2（C-28），22.1（C-11），20.9（C-26），20.4（C-19），20.1（C-27），19.8（C-21），13.1（C-29），12.8（C-18）。以上数据与文献[9]报道的化合物谷甾醇基本一致。

2.7化合物7

白色粉末，茴香醛-浓硫酸显色呈红色。1H-NMR（CDCl3，400 MHz）δ：5.31（1H，brd，J=4.5 Hz，H-6），5.10（ 1H，dd，J=8.4，15.0 Hz，H-22），4.90（ 1H，dd，J= 8.4，15.0 Hz，H-23），3.53（ 1H，m，H-3），1.00-0.75（5 × CH3），0.69（3H，d，J=7.4 Hz，CH3）；13C-NMR（CDCl3，100 MHz）δ：141.8（C-5），140.3（C-22），130.3（C-23），122.7（C-6），72.8（C-3），57.7（C-14），57.0（C-17），522（C-24），51.2（C-9），43.3（C-13），43.3（C-4），41.5（C-20），40.8（C-12），38.2（C-1），37.5（C-10），32.9（C-7），32.7（C-8），32.5（C-25），32.3（C-2），29.9（C-16），26.4（C-28），25.3（C-15），22.2（C-26），22.2（C-21），22.1（C-11），20.4（C-19），20.1（C-27），13.4（C-18），13.1（C-29）。以上数据与文献[10]报道的化合物豆甾醇基本一致。

3结论

斑鸠菊属于菊科斑鸠菊属的植物，目前对该植物地上全草化学成分的研究鲜见报道。该研究成果丰富了对该植物化学成分的认知。通过系统分离纯化，从该植物全草乙醇提取物中分离鉴定了7个化合物，经结构鉴定分别为山奈酚、木犀草素、芹菜素、槲皮素、2（S）-7，3′，5′-三羟基二氢黄酮、谷甾醇、豆甾醇，其中5个黄酮类化合物，2个甾体类化合物，7个化合物均为首次从该植物中分离得到。

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